| 診 狀 |
可 能 的 原 因 |
解 決 方 法 |
(一)
滯留時間變化 |
1.分析管柱溫度變化 |
分析管柱恒溫 |
2.等度(isocratic)與梯度(gradient)間
未能充分平衡 |
至少用10倍分析管柱體積的移動相平衡分析柱 |
| 3.緩衝液容量不夠 |
用>25mmol/L的緩衝液 |
| 4.分析管柱污染 |
每天沖洗分析管柱 |
| 5.分析管柱內條件變化 |
穩定進樣條件
調節移動相 |
| 6.分析管柱快達到壽命 |
採用保護管柱或更換新的分析管柱 |
(二)
滯留時間縮短 |
1.流速增加 |
檢查幫浦，重新設定流速 |
| 2.樣品超載(Overloading) |
降低樣品注射量 |
| 3.分析管柱的鍵合相流失 |
移動相pH值保持在3~7.5
檢查分析管柱的方向 |
| 4.移動相組成變化 |
防止移動相蒸發或沉澱 |
| 5.溫度增加 |
分析管柱恒溫 |
(三)
滯留時間延長 |
1.流速下降 |
管路測漏
更換幫浦密封圈
排除幫浦內氣泡 |
| 2.矽膠分析管柱上活性點變化 |
用移動相改性劑，如加三乙胺，或採用鹼性液 |
| 3.分析管柱的鍵合相流失 |
移動相pH值保持在3~7.5
檢查分析管柱的方向 |
| 4.移動相組成變化 |
防止移動相蒸發或沉澱 |
| 5.溫度降低 |
分析管柱恒溫 |
(四)
出現肩峰
(Shoulder peak)
或分叉
|
1.樣品濃度過高或注射量過多 |
用移動相配製樣品，總樣品體積小於第一峰15%
注射量降低 |
| 2.樣品溶劑過強 |
採用較弱的樣品溶劑 |
| 3.分析管柱塌陷或形成短路通道 |
更換分析管柱
採用較弱腐蝕性條件 |
| 4.樣品含有污染物 |
加在線過濾器(on-line filter)
過濾樣品 |
(五)
Ghost peak |
1.進樣閥(Injector)殘餘樣品 |
每次使用後用強溶劑清洗進樣閥
改善進樣閥和樣品的清洗 |
| 2.樣品中未知物 |
重新處理樣品 |
| 3.分析管柱未平衡 |
重新平衡分析管柱
用移動相作樣品溶劑 (尤其是Ion-pairing
chromatography) |
| 4.三氟乙酸(TFA)氧化 |
每天重新配製
用抗氧化劑 |
| 5.水污染(逆相) |
使用HPLC級的水 |
